蜜蜂人工授精技术

发布时间:2014-10-28 09:46    文章来源:湖北天马养蜂场    浏览量:454 次    【字体大小:正常 偏大 最大

蜜蜂人工授精技术在1927年取得成功,中国开展该项技术的研究始于1959年,20世纪80年代后,已达到国际先进水平,利用该技术取得了单雄授精、单雄多雌授精和自体授精的新突破。作者用聚乙烯授精针头,使人工授精操作更加直观、高效和安全,并且把在实验室操作的实验技术,实现了转地蜂场在野外进行授精的重大突破,选育出喀(阡)黑环系、白山五号、松丹?、?号和蜜浆双高产的黄环系等优质蜂王品种(系)。当前,蜜蜂的人工授精技术,在原种保纯、杂交制种乃至工程育种中起到了不可替代的作用。一、设备和生理液1、仪器设备人工授精仪组合、生物实体显微镜、二氧化碳钢瓶、胶管、洗气瓶、测微尺、血细胞记数板、雄蜂飞翔笼以及常规生化实验仪器设备。2、生理液制备生理液主要用于稀释、保护精液和冲洗器具。生理液有效成分的浓度、溶液的ph等均可影响精子的活力和授精效果。因此,生理液的配制要求十分严格。目前,较为常用的生理液主要有:(1)基辅生理液(paufler,1974):α-羟基柠檬酸三钠2.43克;碳酸氢钠0.21克;氯化钾0.04克;磺胺0.30克;双蒸水100毫升(ph8.4)。(2)甘氨酸生理液:甘氨酸0.75克;氯化钠0.58克;双蒸水100毫升(ph8.6)。(3)氯化钠生理液:氯化钠3.5克;抗生素(如硫酸链霉素)少许(约1.0克);双蒸水400毫升(ph7.0~7.3)。二、授精的环境蜜蜂人工授精工作,无菌操作至关重要。由于操作消毒不彻底,蜂王可能染病死亡或传病给子代。在授精过程中,直接病原就是蜂王和雄蜂体表以及人的皮肤。因此,在进行人工授精过程中严格要求无菌操作是十分必要的,要求:窗明几净,地面清洁无浮尘,采精前2小时,用5%来苏儿喷洒地面;台面用75%酒精擦拭;空间用紫外线灯照射;小型器皿、刀、剪、钩、针用煮沸锅消毒至少30分钟;塑料针头和有机制品,用配有抗生素的消毒液、双蒸水、生理液依次冲洗,所有已消毒的器物,均须妥善放置,谨防二次污染。所有用作灭菌的酒精和消毒剂,不得与雄蜂、雄蜂精液和蜂王接触。蜜蜂人工授精操作环境,除了要求无菌操作外,适宜的温度也是十分重要的。温度太低,蜂王容易冻僵,雄蜂活动迟缓而不利排精,给采精操作带来困难。室温在20℃~30℃,授精效果较为理想。三、人工授精1、精液采集雄蜂选择。雄蜂出房12天后,即达性成熟,便可捕捉采精。性成熟雄蜂的捕捉方法,有利用颜色标记雄蜂日龄法、巢内直接选择性成熟雄蜂法、巢门捕捉婚飞雄蜂法和捕捉幽闭饲养雄蜂法,但是无论哪种方法捕捉雄蜂,均要求所捕雄蜂种纯、个大、健壮、活跃和性成熟。强迫排精。用左手拇指和食指从腹面捉住胸、腹部两侧,用右手拇指按压雄蜂的腹部背板1节~3节处,然后三指配合,同时向腹部尾端施加压力,强迫“阴茎”外翻并射精。注意用力适度,以保精液在“阴茎”顶端形成近球状,以利采集且不易被污染。精液采集。雄蜂精液的采集有两种方法:一是体视显微镜下,直接用进样器逐只雄蜂采集精液;二是采用漂洗技术采集精液。目前,应用较普遍的方法是第一种,该法应用简便快捷,随采随用,精子活力强,污染机会少,授精效果理想。其方法为:先将针头吸入少许生理液和气泡,然后,右手操纵进样器,使针头与精液接触,后稍微拉开点距离,但二者并不断开,这样就能借助于精液本身的粘滞性,把覆盖在白色粘液上的土黄色精液较完全地抽吸进针头,然后继续采集其它雄蜂的精液,但要注意:每2只雄蜂的精液间,不应出现气泡隔离;待针头内贮满所需精液量后,用生理液封闭针头,以防精液干涸或污染;将针头外侧粘附杂物用浸过抗生素的棉签擦去后,便可提升针头的位置,准备给蜂王授精。2、精液注射处女王的选择。处女王的质量关系到人工授精的效果和新建蜂群的质量,要求人工授精处女王个体大、腹部硕长、无残损、行动稳健、性成熟。处女王麻醉。处女王装入麻醉室后,安装到授精仪上,开启二氧化碳钢瓶阀门,调节至每分钟从洗气瓶冒出300个气泡为宜,麻醉30秒左右,蜂王进入昏迷状态,直到授精完毕,方可解除麻醉。3、授精打开螫针腔。蜂王麻醉后,调整显微镜,在镜下移动背腹钩操纵杆,使背腹钩在探针配合下,分别钩住背腹板顶端的中央位置,并向外侧拉动背腹板,使其间距为3毫米~4毫米,然后再移动背钩,使其“膨大”部分嵌入到螫针腔基部的三角缝内,再拉动背腹钩,把背腹板间距拉至5毫米~6毫米。进针注射。螫针腔打开后,调整蜂王和针头的角度,排除针头尖中的生理液和气泡后,使针尖接近阴道口,用探针压住瓣突,将针尖徐徐推入阴道直至中部输卵管,取出探针,将精液慢慢注入。一次性授精通常注入8微升精液;两次性授精,每次各注4微升~5微升精液,其间隔24小时~48小时。授精完毕,10秒~15秒后退出针头,取出蜂王,点上标记,待其复苏后,送回原核心群或框式王笼暂时贮存。四、人工授精后的管理蜂王人工授精后,需要细心管理,注意以下几个方面:首先,蜂王授精后要及时放回原核心群(或大群),使其能得到工蜂饲喂,不致受饿而影响发育;其次,要保证授精王所在蜂群的蜂数,以便蜜蜂能自行调节巢温;因为,温度是制约精子转移的重要因素;另外,还要预防蜂王出巢进行自然交尾,方法是将蜂王剪翅或幽闭巢门,防止蜂王外出,也可利用大型框式王笼封闭观察其产卵情况。

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